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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠食管成纖維細胞
產(chǎn)品簡介：
大鼠食管成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：組織相容性抗原DQA1重組兔單克隆抗體 神經(jīng)叢蛋白A4抗體 氧固醇結(jié)合蛋白樣10抗體 大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞 小鼠卵巢上皮細胞 人黑色素瘤細胞；MNT-1 CCC-SMC-1 (兔主動脈平滑肌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：302
更新時間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠食管成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
食管 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7826 |
細胞簡介：
大鼠食管成纖維分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺蛯樱彻苁构芮蛔儶M窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。食管的外膜，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，富有血管、淋巴管及神經(jīng)。主要包含食管成纖維細胞，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠食管成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠食管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠食管成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人正輔因子4(PC4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit
人脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit
人脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit
豚鼠白介素8(IL8)試劑盒 ，英文名： IL8 ELISA Kit
Human ierferon inducible protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒
rabbitNervegrowthfactor,NGFELISAKit 兔子神經(jīng)生長因子(NGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAZTELISAKit大鼠
線蟲亞(ENU)誘導突變試劑盒10次
RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISAKit兔載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒規(guī)格：96T/48T
垂體特異性同源因子抗體
內(nèi)臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體
IL18R1重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)
CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ING5 Protein Human 重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽)
EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)
ING5 Protein Human 重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽)
IL18R1重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠食管成纖維細胞人整合素αⅤβ3(Iegrin αⅤβ3)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-j試劑盒j鏈(Ig-j)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
HumanleukocyteaigenC,HLA-CELISAKit人類白細胞抗原C(HLA-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
