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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
小鼠心肌成纖維細胞
產(chǎn)品簡介：
小鼠心肌成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：粘脂蛋白3抗體 鋅指蛋白785抗體 XRN1蛋白抗體 小鼠嗅球神經(jīng)元細胞 大鼠骨外膜細胞 SCaBER人膀胱癌細胞 SNU-878細胞
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：921
更新時間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠心肌成纖維細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7270 |
細胞簡介：
小鼠心肌成纖維分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結(jié)構(gòu)和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責(zé)細胞基質(zhì)外的合成，當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞，其功能活動也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù)。因此，對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠A(CsA)試劑盒
Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenα-Glucosidase,a-Glu試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞αSMA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)試劑盒規(guī)格：96T/48T
AF750標(biāo)記的多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白DAT抗體
白細胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體
NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein
蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠心肌成纖維細胞大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)試劑盒 ，英文名： PKCζ ELISA Kit
N cadherin / neural cadherin (N-Cad) ELISA Kit 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)試劑盒
RatIerleukin17,IL-17ELISAKIT 大鼠白介素17(IL-17)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCXCR3(HumanCXC-chemokinereceptor3)ELISAKit人CXC趨化因子受體3
細胞色素P450亞酶CYP2E1(NPH)活性比色法定量試劑盒20次
RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰合成酶(ACS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
